产品货号:
YTB3523
中文名称:
SDS-PAGE浓缩胶预混液
英文名称:
SDS-PAGE Stacking Gel Premix
产品规格:
250mL|500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品提供了简单而又超快速地制备SDS-PAGE浓缩胶(上层胶)所需的主要试剂,包括Tris-HCl(pH6.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等。本浓缩胶预混液已经把SDS-PAGE凝胶浓缩胶配制所需的Tris-HCl (pH6.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等预混合好,使用前仅需加入适量凝胶聚合催化剂(过硫酸铵或其替代物,如过硫酸铵替代物)和TEMED替代物即可简单快速地完成浓缩胶的配制。
本制品用于配制最常用的5%浓度浓缩胶,如您需要配制特殊浓度的浓缩胶,可以考虑单独购买30% Acr-Bis(29:1)、10% SDS和1M Tris-HCl(pH6.8)等进行特殊浓度SDS-PAGE凝胶浓缩胶的配制。本浓缩胶预混液可以直接配合不同浓度的SDS-PAGE分离胶预混液使用,轻松超快速完成各种不同浓度SDS-PAGE凝胶的配制。
组分 | 250mL | 500mL |
SDS-PAGE浓缩胶预混液 | 250mL | 500mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:2~8℃,避光,有效期1年。
本制品的250mL包装约可配制50-100块常规大小的SDS-PAGE凝胶的浓缩胶,500mL包装约可配制100-200块常规大小的SDS-PAGE凝胶的浓缩胶。具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。
- 根据目的蛋白的分子量大小选择合适浓度的SDS-PAGE分离胶(即下层胶)。
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下:SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50~150kD 8%胶 30~90kD 10%胶 20~80kD 12%胶 12~60kD 15%胶 10~40kD - 称取适量过硫酸铵或其替代物,如过硫酸铵替代物(货号:YTB3599),用双蒸水或其它高纯度的水配制10%溶液。过硫酸铵或其替代物配成溶液后容易失效,需注意存放及时间限制。
- 参考下表,在分离胶凝固后,在SDS-PAGE浓缩胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的10%过硫酸铵或其替代物溶液,按照0.1%的比例加入相应量的TEMED。例如10mL SDS-PAGE浓缩胶预混液中,加入100μL 10%过硫酸铵或其替代物溶液和10μL TEMED,适当混匀。去除分离胶上面覆盖的液体,尽量去干净,然后倒入添加了10%过硫酸铵或其替代物溶液和TEMED的SDS-PAGE浓缩胶预混液,插入梳子待凝固。浓缩胶凝固后,则表明制胶步骤结束,可以准备进行后续的电泳了。通常10~30分钟内胶会凝固。
- 具体的凝固时间和温度及光照有关,说明书中10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的正常推荐用量是室温为25℃时的推荐用量。为达到与25℃时相近的凝固时间,当室温低于25℃时,可以适当同时加大10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的用量,例如20℃时建议用量是正常推荐用量的1.5倍,15℃时建议用量是正常推荐用量的2倍。
成分 配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(mL) SDS-PAGE浓缩胶预混液 2 3 4 6 8 10 10%过硫酸铵或其替代物 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1 TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01 - 配制好的凝胶如果当天不能使用,可以在4℃保存1~2天后使用。
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